ПЦР анализе: шта је то? Како да се анализа ПЦР

Није тако давно развио поуздан, веома осетљиве и брзо метод за дијагнозу разних заразних болести код људи. Такав метод се зове "ПЦР анализа". Шта је то, шта је њена суштина, оно што може да идентификује микроорганизме и како да га узме, ми ћемо описати у овом чланку.

Историја открића

Измислио ланчану реакцију полимеразе (ПЦР) је амерички научник Цари Миуллис у 1983. У почетку, патентирана метода дијагностике компаније "Кит Цорпоратион", у којој је радио и његовог творца. Али у 1992 сва права и патенти су продата компанији "Хофман-Ла Роцхе." Након тога, испоставило се да су слични студија спроведена у паралелно и су пријавили других америчких биолога, као што је Елис Цхен, Давид Едгар, Јохн РРЕ. Године 1980. је ангажован у овом питању и совјетских научника О Слиусаренко О Каледин и С Городецки. Због тога, да се утврди власник ауторских права једини није било могуће. Многи изузетан биохемичара су допринели развоју метода за полимераза реакција и ЦЕРН-патентирано својим иновацијама. У овом тренутку анализе ПЦР се врши кроз специјално опремљеним лабораторијама.

РЕЗИМЕ ПЦР диагностиц

ПЦР анализе: шта је то и како се то ради? Суштина метода лежи у чињеници да коришћењем специјалног ензима ДНК полимеразе ин витро за повећање запремине специфичном микроба окружењу. Да би то урадили, више пута размножава постојећи ДНК материјала. Стога, присуство патогена у узорку износ ће бити повећана на рачун биохемијске лабораторијске манипулације, а бактерије неће бити тешко открити под микроскопом.

Како је студија материјала?

Да би се извршила анализу потребно:

• ДНК шаблон;
• прајмери материјал повезује крајеве фрагментом;
• термостабилна ДНК полимераза ензим;
• хемикалије, обезбеђивања правилног рада ензима;
• пуфер раствор је потребан за стварање одговарајућих услова за раст и развој ДНК материјала.

Да бисте извршили ПЦР раде 25-30 понављања састоје од три корака: денатурација, жарење и елонгације.

Да анализира полимезарнои ланчану реакцију помоћу специјалног уређаја - бициклиста. Савремена опрема омогућава да инсталирате потребну за грејање и хлађење цеви програм за елиминацију грешака у дијагнози.

Где се пријавити дијагнозе?

Полимезарнои метход ланчана реакција се користе у различитим областима медицине:

• Форенсиц га користе како би идентификовали генетски материјал, попут косе, пљувачком или крви;
• ПЦР анализа крви помаже генотип, нпр за детекцију индивидуалне генетске засађено одговор на специфичног лека;
• методом сет породичних веза између људи;
• најтраженији ПЦР метода је постала у медицинској дијагностици за одређивање разних заразних болести.

Шта инфекција открива ПЦР?

Тако, медицина већ дуго успешно користи ПЦР анализе. Шта је то, што смо већ научили. А неки патогени могу да се открију са њим? ПЦР дијагностикује следеће инфекције :

• хепатитис А, Б, Ц;
• уреапласмосис;
• кандидијаза;
• кламидија;
• мицопласмосис;
• бактеријска вагиноза;
• Инфективна мононуклеоза;
• трихомонијаза;
• ХПВ инфекција;
• туберкулоза;
• херпеса инфекције 1. и 2. врсте;
• Хелицобацтер пилори инфецтион;
• цитомегаловирус;
• дифтерије;
• салмонелозе;
• ХИВ инфекција.

Такођер, ПЦР методе користе у дијагнози карцинома.

предности методе

Диагностиц ПЦР има неколико предности:

1. Високе осетљивости. Чак и са само неколико молекула ДНК микроорганизама ПЦР анализом одређује присуство инфекције. Помаже метод хроничних и латентне болести јављају. Често у таквим случајевима, је микроорганизам необрађено на друге начине.
2. У циљу испитивања било ког прикладног материјала, као што је пљувачке, крви, сексуалне селекције, косе, епителних ћелија. Најчешћи је тест крви и урогениталног брис ПЦР.

3. Није потребна проширену растуће културе. Аутоматизована Процес дијагностике омогућава добијање резултате студије после 4-5 сати.
4. Метода је скоро потпуно аутентичан. Рецордед само изоловани случајеви лажних негативан резултат.
5. У стању да идентификује неколико врста патогени од један узорак материјала. Ово не само да убрзава процес дијагнозе болести, али и значајно смањује материјалне трошкове. Често, доктор прописује свеобухватну анализу ПЦР. Прице сурвеи, који се састоји од одређивања шест патогена је око 1.500 рубаља.

Препоруке о припреми за анализу

Резултати важеће студиј ПЦР треба да се тестирају, након препорукама прелиминарних припрема за дијагнозу:

1. Пре уручења пљувачке уздржите се од исхране и лека за 4 сата пре узорковања материјала. Непосредно пре процедуре, испрати уста са кључале воде.
2. Ова правила морају бити вођена и када се узме узорак из унутрашњости образа. Након испирања се препоручује да се изврши светло масажу на кожи да ослободи простате секрета.
3. Урин се обично сакупљају код куће. Да бисте то урадили, потребно је да се спроведе темељна тоалет на гениталијама. У стерилном пластичној посуди је неопходно прикупити 50-60 мл урина. То се препоручује за жене да убаците тампон у вагини, а мушкарци што је више могуће извући кожа пута како би се осигурала чистоћа материјала. Ви не можете узети материјал током менструације.
4. За испоруку сперматозоида да се уздржавају од сексуалних односа током 3 дана пре сакупљања материјала. Такође, лекари су саветовали да напусте коришћење сауне и топле купке, алкохол и зачињена храна. 3 сата пре анализа треба да се уздрже од мокрења.
5. Да донесе урогениталну брис, на пример, ако анализа на хламидију ПЦР, и жене и мушкарци се препоручује да се сексуално остатак за 3 дана. 2 недеље пре анализе не може да антибиотике. За недељу дана треба да престану да користе интимни гелови, масти, вагиналета, испирање. 3 сата пре студије уздржите се од мокрења. Током менструација ограда материјал се не спроводи, само 3 дана након престанка мрља може да урогениталну бриса.

ПЦР-током трудноће

Период чекања за бебу, многе инфективне болести, полно преносиве болести, изузетно су опасни за нормалан развој фетуса. Полне болести могу изазвати интраутерини развој, побачаја или превременог порођаја, урођених аномалија детета. Због тога је важно да се у раној трудноћи сцреенинг ПЦР. Пасс анализа је неопходна приликом регистрације - до 12 недеља.

Ограда материјал потиче из цервикалног канала са посебним четке. Поступак је безболан и не представља опасност за бебу. Нормално током трудноће анализирани за Хламидија ПЦР метода, као и уреапласмосис, мицопласмосис, цитомегаловирус, херпес папилома вирус. Такво испитивање комплексу ПЦР 6.

ПЦР за дијагнозу ХИВ

Због чињенице да је метод полимераза ланчаном реакцијом је веома осетљива на промене у телу и условима дијагнозе, многи фактори могу утицати на исход. Зато ПЦР анализа за ХИВ инфекција није поуздан метод, његова ефикасност - 96-98%. Преосталих 2-4% од теста даје лажне позитивне резултате.

Међутим, у неким ситуацијама без ПЦР дијагностику ХИВ не може да уради. Обично, она се одвија на особе са лажним негативна ЕЛИСА. Ове бројке показују да је особа још увек није развила антитела на вирус и не може се детектовати без повећања броја мултипле. Да се то може постићи спровођењем тест крви ПЦР методом.

Такође, потребно је дијагноза деце прве године живота, родила ХИВ позитивних мајки. Метода је једини начин да се поуздано утврди статус детета.

ПЦР за дијагнозу хепатитиса

Ланчана реакција полимеразом може открити ДНК вируса хепатитиса А, Б, Ц, много пре формирања антитела на инфекцију или појаве симптома болести. Посебно је ефикасан је ПЦР анализа о хепатитис Ц, јер 85% такве болести су без симптома и без благовременог лечења постаје хронична.

Благовремено откривање патогена помоћи ће избегле компликације и дуготрајно лијечење.

Интегратед ПЦР скрининг

Свеобухватна анализа ПЦР: шта је то? Овај скрининг метода полимезарнои ланчана реакција која укључује одређивање истовремено неколико инфекција, врсте: Мицопласма гениталиум, Мицопласма хоминис, Гарднерелла вагиналис, цандида, трицхомонас, цитомегаловирус, Уреапласма уреалитикум, херпес 1. и 2. тип, гонореја папилломавирус. Цијена ове дијагнозе се креће од 2.000 до 3.500 рубаља. зависности од клинике, материјала и опреме, као и од врсте анализе: квалитативног и квантитативног. Оно што је потребно у вашем случају - доктор одлучи. У неким случајевима, ви једноставно детектује присуство патогена у другим, као што је ХИВ, важне улоге коју квантитативном титра. називају "ПЦР анализа 12" у дијагностици свих патогена прегледа изнад.

Одгонетне резултате анализе

Транскрипција ПЦР анализа је једноставна. Постоје само 2 Индекс размера - ". Негативан" "позитиван" и Након детекције патогена може доктора са 99% поверења -а потврђују присуство болести и почети лечење пацијента. У квантитативном начину утврђивања инфекције у одговарајућем индекса колоне броја откривених бактерија ће бити наведен. Само лекар може да утврди степен болести и прописује неопходну терапију.

У неким случајевима, на пример у одређивању ХИВ инфекције помоћу ПЦР, са негативним резултатом, постоји потреба за додатним истраживања да потврде ове бројке.

Где да се тестира?

Где пролазе-ПЦР анализе у јавном клиници или приватној лабораторији? Нажалост, у општински медицинске институције опрема и методе су често застарели. Због тога је боље да се да предност приватне лабораторије са савременом опремом и високо квалификовани кадар. Поред тога, у приватној клиници да добијете резултате много брже.

У Москви, многе приватне лабораторије нуде ПЦР анализе за различите инфекције. На пример, у таквим клиникама као "Вита", "Интегратед Цлиниц", "Срећна породица", "Уро-Про", изведена ПЦР анализе. цена Истраживање је 200 рубаља. за одређивање патогена.

Може се закључити да је дијагноза заразних болести, ПЦР у већини случајева је брз и поуздан начин да се открије патогена у тело у раним фазама инфекције. Ипак, у неким случајевима, да изаберу друге методе дијагностике. Одредите потребу за таквим студије могу бити само специјалиста. ПЦР анализом Дешифровање захтева професионални приступ. Следите савете лекара и не дају своје тестове, које нису потребне.